昨晚搞到凌晨两点,
我终于把那个该死的GEO矩阵文件给搞定了。
起因很简单,
为了节省磁盘空间,
我手贱点了个log转化。
结果发现,
这玩意儿一旦Log化,
原来的数值精度就没了。
你想找回原始表达量?
难如登天。
但我还是死磕出来了,
今天就把这血泪史写下来,
帮大家省点头发。
咱们先说个概念。
很多新手不知道,
GEO里的GPL平台文件,
还有GDS系列,
有时候为了压缩体积,
会把表达矩阵进行Log2处理。
看起来是科学,
实际上对于咱做差异分析的人来说,
简直是噩梦。
特别是那种已经归档很久的老数据,
你根本不知道它当时是不是被Log化了。
这时候你要是直接拿去做标准化,
那结果简直没法看。
那GEO数据库log化后数据怎样还原呢?
别急,听我慢慢讲。
首先,你得确认有没有原始数据。
这是最关键的一步。
如果你运气好,
或者那个研究组够良心,
在GEO的Sample里能找到原始CEL文件或者IDAT文件。
要是找到了,
那就万事大吉。
你直接下载这些原始探针数据,
再用你本地的一套流程重走一遍。
R语言里用affy或者oligo包,
就能把那些灰溜溜的数值重新算出来。
这才是真正的王道,
没有任何数据损失。
可是,
现实往往是残酷的。
很多时候,
你只能下载到那一个巨大的Log矩阵。
这种情况下,
GEO数据库log化后数据怎样还原就成了个大问题。
说实话,
如果真的被Log2过,
数学上是可以反推的。
公式也很简单,
就是2的x次方。
也就是Power(2, value)。
理论上可行,
但我必须提醒你,
这招有个大坑。
那就是背景噪声。
原始数据里那些接近0或者负数的值,
一旦Log2就会变成极小值甚至报错。
如果你拿到的数据里,
有很多缺失值NA,
那反推回去全是乱码。
我试了好几个样本,
发现边缘数据完全对不上。
所以,
如果数据不全,
这方法基本宣告失败。
还有一种折中的办法。
那就是去找对应的Platform文件。
有时候,
虽然表达矩阵被Log化了,
但那个探针注释文件里,
会带着原始的强度值或者说明。
你可以通过探针ID,
去比对原始的分布规律。
但这需要极强的统计学功底,
还得有个参照组。
比如,
同一批次的正常组织数据。
用这个去校准,
也许能大概估计出原始的量级。
但这只能用于定性分析,
别指望能用于高精量的定量PCR验证。
再说说心态。
做生物信息,
心态崩是常态。
我刚开始看到Log矩阵,
脑子里是一片空白。
想着要不用机器学习补全?
结果发现训练集都没法对齐。
最后只能老老实实去翻GEO的记录文档。
在Series Matrix File的头部注释里,
我看到了作者写的备注。
原来他们在预处理时,
统一做了Log2转换。
那一刻,
虽然希望灭了,
但至少知道死因了。
所以,
总结一下。
如果还能下到原始文件,
千万别手滑Log化。
如果已经Log化了,
先看能不能反推。
能反推最好,
不能反推就别硬搞。
GEO数据库log化后数据怎样还原,
核心不在技术,
在运气和数据完整性。
别信那些说能完美复原的第三方软件,
大部分都是在扯淡。
数据就是数据,
丢了就是丢了。
与其事后诸葛亮,
不如事前多备份。
把那些占空间的原始日志文件,
打包传到云端,
或者直接冷存储起来。
别省那几个G,
到时候哭都没地方哭。
我就分享到这,
希望能帮到正在抓狂的你。
如果还有问题,
评论区见,
咱们一起讨论。
毕竟,
在这个领域,
独行者快,
众行者远。