刚跑完一个项目 头发少了一大把
真的 这种数据整合的活 太磨人了
之前以为把两个矩阵拼一起就行
结果发现完全不是那回事
Geo数据 特指基因组表达数据 但很多新手连这都搞混
Tcga 就更不用说了 标准库
但是 把它们合一起 坑比海深
本文关键词:geo数据与tcga数据合并
我一开始也是直接读进来
用R语言 还是Python 看习惯
不管哪个 第一步就卡住了
ID不一样啊
GEO用的是GSE编号 TCGA用TCGA-ID
怎么对齐
别跟我说你手动改
几百个样本 改到天荒地老吗
我尝试过批量重命名
结果发现还有探针不一致的问题
GEO的芯片五花八门 TCGA相对标准
这时候你就得清洗数据了
我当时的思路是
先各自标准化
然后再找交集
听起来很逻辑对吧
但是 实际操作中
你会发现很多基因在两边都缺失
或者 一方是0 另一方是NaN
这时候 填0?
千万别 直接填0 会把生物学意义毁掉
我后来咨询了一个前辈
他说 要做交集保留
而且 还要做批次效应校正
对 批次效应
这个真的是噩梦
两个数据集 就像来自两个平行宇宙
数值分布完全不一样
直接用 limma 或者 svaseg
如果不校正 后续的差异分析 全是错的
我用了ComBat
效果还行
但是 调参调了两天
感觉像是在做化学实验
稍微改一点参数 结果就变了
这时候 你就得静下心来
画图 看箱线图
看分布图
如果 两组数据的中位数还差着十万八千里
那你白忙活了
还有个细节 很多人忽略
就是数据格式
GEO下载下来的 txt 文件
有时候分隔符不一样
Tab 还是 Comma
甚至有的还有空格
我用 pandas read_csv 读的时候
指定 separator='\t' 还是报错
最后发现 是 Windows 换行符的问题
把 \r\n 去掉才正常
这点真的 太容易出bug了
我卡在这里 一个下午
看着报错信息 眼神都木了
后来我换了个思路
不直接合并 先分别分析
然后再元分析
虽然麻烦 但是 稳
如果你非要合并
一定要记住
数据质量大于一切
宁缺毋滥
那些缺失值太多的样本
直接扔掉
别舍不得
数据 是带不走的 命是你自己的
还有一个坑
就是注释信息
GEO的probe注释 经常是旧版的
TcGA用的是 Refseq 或者 Entrez ID
你需要映射
用 biomart 或者 R 包的 org.Hs.eg.db
这一步 也很耗时
因为版本更新快
昨天还对的 ID 今天可能就变了
我建议大家
固定环境
用 Docker 或者 Conda
把 R 和 Python 环境锁死
不然 复现个鬼
而且 文档要写清楚
哪些样本用了
哪些基因过滤了
每一步 都要有日志
不然 三个月后 你自己都看不懂
现在的代码 一团乱麻
我想加个注释 发现不知道哪行在干嘛
这种痛苦 只有做过的人懂
关于 geo数据与tcga数据合并 的预处理
其实核心就是三点
清洗 校正 对齐
别整那些花里胡哨的算法
先确保数据干净
再做生物学分析
我见过有人 直接拿原始数据跑 DESeq2
然后 发了一篇文章
审稿人没问 但读者问
后来被撤稿
何必呢
数据 是要对得起读者
对得起自己良心的
所以 慢一点
再慢一点
把每一步 都跑通 再走下一步
如果你也在做类似的数据整合
别一个人硬扛
多看 别人的代码
StackOverflow 上有很多神贴
或者 去 GitHub 找找相关的 pipeline
不要闭门造车
我后来发现
有个开源的工具 专门做这个
虽然不太出名 但是 很稳
推荐大家 去看一下
具体名字 我就不写了
怕广告嫌疑
自己去搜
最后说点 掏心窝子的话
科研 就是一场马拉松
拼的不是速度
是心态
遇到 bug 别急
泡杯茶 听听歌
缓一缓
也许 换个思路 就通了
如果你 在 geo数据与tcga数据合并 的过程中
遇到了 特别棘手的 问题
比如 批次效应去不掉
或者 差异基因 结果 和 文献 对不上
欢迎 来 找我 聊聊
我可以 帮你 看看 代码
不一定 能 解决
但 至少 可以 提供 几个 思路
毕竟 我也 是 这么 走过来的
希望 这些 经验
能 帮 到 你
少 踩 点 坑
祝 你 实验 顺利
早日 上岸
记得
数据 清洗 比 分析 更重要
这句话
请 刻 在 你的 电脑 屏幕 上】