基本信息中文名称B2 链片段精 - 天冬酰胺 - 异亮 - 丙 - 谷 - 异亮 - 异亮 - 赖 - 天冬 - 异亮三字母序列Arg-Asn-Ile-Ala-Glu-Ile-Ile-Lys-Asp-Ile单字母序列RNIAEIIKDI分子式C52H93N15O16分子量1184.41结构特征十肽线性多肽无 N 端乙酰化、C 端酰胺化修饰无 D 型氨基酸不含半胱氨酸残基无巯基、二硫键无荧光、生物素标记基团。氨基酸依次为 Arg、Asn、Ile、Ala、Glu、Ile、Ile、Lys、Asp、Ile。该片段为 B2 链来源活性片段常作为钙调蛋白结合肽是钙调蛋白Calmodulin, CaM的结合区域。结构式基本性质线性十肽序列同时含有碱性氨基酸 Arg、Lys酸性残基 Glu、Asp还有大量疏水残基 Ile、Ala属于两亲性多肽。水溶性尚可高浓度下大量疏水 Ile 残基会降低溶解度在偏酸性缓冲液中更容易析出。不含有 Cys不存在巯基氧化二聚风险。粉末有吸湿性水溶液对肽酶敏感肽键缓慢水解高温、碱性条件加速降解。理论等电点接近中性。作用机理该 RNIAEIIKDI 肽是经典钙调蛋白结合肽取自肌球蛋白轻链激酶 MLCK 的 B2 链钙调蛋白结合区域。钙调蛋白结合钙离子后构象发生改变暴露疏水口袋这条多肽可以结合 Ca²⁺-CaM 复合物。结合后能够阻断 CaM 与其下游天然靶蛋白MLCK的相互作用属于钙调蛋白拮抗剂。 结合依赖多肽的两亲性 α 螺旋结构当结合 CaM 时多肽折叠成两亲 α 螺旋疏水一面嵌入钙调蛋白的疏水沟槽带电氨基酸参与静电相互作用。在无 Ca²⁺条件下该肽和 apo-CaM无钙钙调蛋白结合能力很弱具有钙离子依赖性。应用领域科研工具肽仅限体外生化实验不可用于人体给药或临床诊断。钙调蛋白结合实验体外 CaM 结合测定等温滴定量热 ITC、荧光偏振、pull-down 实验测定结合亲和力。钙调蛋白功能抑制实验在离体体系中竞争性拮抗 CaM抑制 CaM 依赖的下游激酶MLCK、CaMKII 等活性。蛋白 - 多肽相互作用构效关系 SAR 研究氨基酸定点突变研究 α 螺旋、疏水残基、电荷在 CaM 识别中的贡献。圆二色谱 CD 测试研究多肽构象观察钙离子、CaM 诱导多肽从无序态向 α 螺旋转变。药物研发钙调蛋白参与众多细胞信号通路调控平滑肌收缩、细胞增殖、离子通道、炎症反应。CaM 是潜在药物靶点。 该多肽仅作为科研工具不适合直接开发成药物。分子极性高难以穿透细胞膜体内极易被肽酶快速水解半衰期极短。药物研发思路是基于该肽的结合结构设计小分子模拟物竞争性阻断 CaM 与靶蛋白相互作用目前该方向大多处于基础研究阶段没有上市药物。研究进展RNIAEIIKDI 是广泛引用的 CaM 结合肽来源于肌球蛋白轻链激酶Myosin Light Chain Kinase, MLCKB2 链。研究证实多肽在溶液游离状态是无规卷曲当和 Ca²⁺-CaM 结合后诱导形成 α 螺旋。疏水的连续 Ile 残基是结合的核心突变疏水残基会显著削弱和 CaM 的亲和力。该肽常和其他 CaM 结合肽如 CaMK 来源片段做对照用于比较不同靶序列和钙调蛋白之间的结合强弱。储存规范粉末-20℃密封干燥避光保存尽量减少反复开盖防止吸潮。溶液现配现用推荐中性缓冲液配制分装单次使用小份-20℃冻存避免多次冻融。该肽含多个疏水 Ile配液时留意有无浑浊析出避免长时间室温放置避开强碱。